植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素及木质素等物质构成。甘露聚糖是植物半纤维素的重要组分,是由β-1,4-d-甘露糖连接而成的线状多聚体,在多糖的侧链上主要有葡萄糖基、乙酰基和半乳糖基等取代基团,图1为甘露聚糖的分子结构示意图。甘露聚糖具有高亲水性,在单胃动物的消化道内大量吸水,增加了消化道内容物的粘度,抵抗胃肠的蠕动,直接影响动物对营养物质的消化和吸收。近年来,随着豆类产品(豆粕等)在动物饲料中的广泛应用,甘露聚糖的抗营养作用也越来越受到重视,在饲料中添加酶制剂是解决这一问题的主要途径。甘露聚糖的完全酶解需要β-甘露聚糖酶(ec3.2.1.78)、β-甘露糖苷酶(ec3.2.1.25)、β-葡糖苷酶(ec3.2.1.21)、α-半乳糖苷酶(ec3.2.1.22)和脱乙酰酶(ec3.1.1.6)的协同作用,其中β-甘露聚糖酶在饲料中的应用比较广泛。
1. β-甘露聚糖酶的来源和酶学性质研究
β-甘露聚糖酶广泛存在于自然界中,在一些低等动物(如海洋软体动物littorina brevicula)的肠道分泌液中、某些豆类植物(如长角豆、瓜儿豆等)发芽的种子中以及天南星科植物魔芋萌发的球茎中都发现了β-甘露聚糖酶酶活的存在。而微生物(包括真菌、细菌和放线菌等)则是饲用β-甘露聚糖酶的主要来源,各种微生物产生β-甘露聚糖酶的条件和所产酶活性的高低、酶的性质和作用方式以及蛋白质一级结构等均有所不同。微生物来源的β-甘露聚糖酶具有活性高、成本低、提取方便以及比动植物来源的有更广的作用ph 值、温度范围和底物专一性等显著特点,备受研究者的重视,其中,细菌中的芽孢杆菌、假单胞菌、弧菌,真菌中的曲霉、青霉、酵母、木霉和放线菌中的链霉菌等产的β-甘露聚糖酶等研究的较多,表1中列出了部分微生物产的β-甘露聚糖酶及其酶学特性。
目前,已有许多不同来源的β-甘露聚糖酶获得了纯化,如田新玉(1993)首先报道了嗜碱性芽孢杆菌bacillus sp.n16- 5 产生的3种胞外碱性β-甘露聚糖酶。杨文博(1995)、余红英(2003)、吴襟(2000)分别对地衣芽孢杆菌bacillus lichienoformis nk-27产生的碱性β-甘露聚糖酶、枯草芽孢杆菌sa-22产生的中性β-甘露聚糖酶、诺卡氏菌形放线菌nocardioform actinomycetes na3-540c 产生碱性β-甘露聚糖酶的纯化及性质作了报道。在真菌方面,田亚平(1998)、王和平(2003)分别就黑曲霉wx-96所产的β-甘露聚糖酶、里氏木酶rutc-30 所产的酸性β-甘露聚糖酶进行了酶纯化和性质研究。国外ademark(1998)和yosida(1997)分别报道了黑曲霉、环状芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的纯化和性质。不同微生物所产的β-甘露聚糖酶的分子质量、最适反应ph、等电点、最适反应温度、酶动力学常数、底物专一性等都有一定的差异。β-甘露聚糖酶的分子质量小的只有22kda,大的可以达到162 kda,相差十分悬殊,但大部分在30 kda~55 kda。