华支睾吸虫 IgG 抗体检测试剂盒说明书 【产品名称】
通用名称：华支睾吸虫 IgG 抗体检测试剂盒 英文名称：Clonorchis sinensis（C.s）IgG Antibody Test Kit
【包装规格】48 份/盒、96 份/盒
【预期用途】本试剂盒采用夹心 ELISA 方法定性检测人血清或血浆中的华支睾吸虫抗体。
【检测原理】如果待检样品中含有华支睾吸虫抗体，就会与包被板上的华支睾吸虫抗原及第二 步加入的华支睾吸虫抗原酶标结合物特异性结合。间接结合在包被板上的华支睾吸虫抗原 酶标结合物与底物反应的显色状况即可反映出样品中是否含有华支睾吸虫抗体。
【储存条件及有效期】 2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为 12 个月。
【适用仪器】 含 450nm 和 630nm 波长的酶标仪；37℃恒温设备；可调微量移液器。
【样品要求】 1. 本试剂仅适用于检测人血清或血浆； 2. 为取得zuijia实验效果，避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品； 3. 短期（3 天内）将进行检测的血清样品可存放于 2～8℃；如需长期保存，应置于-20℃ 或以下，避免反复冻融。
【检验方法】 1. 加样品稀释液：每孔加样品稀释液 1 滴。 2. 加样反应：样品孔，每孔仅加入 50μL 待检样品；空白对照 2 孔，每孔仅加入 50μL 样 品稀释液；阴性对照 2 孔，每孔仅加入 50μL 阴性对照品；阳性对照 2 孔，每孔仅加 入 50μL 阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光反应 30 分钟。 3. 洗板：甩去孔内液体，每孔加洗涤液（2 号液）1 滴，立即用蒸馏水注满，静置 30 秒 后甩去；再直接用蒸馏水洗涤四次，每次均需静置 30 秒；最后一次甩去拍干。 4. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加酶结合物（1 号液）2 滴，盖好封板膜，37℃ 避光反应 30 分钟。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。 5. 显色反应：加底物（3 号液）和显色剂（4 号液）各 1 滴，混匀，盖好封板膜，37℃ 避光显色 10 分钟。 6. 终止反应：加终止液（6 号液）1 滴，以空白对照调零，用酶标仪于 450nm 波长（630nm 作为参比波长）读取 OD 值。
【参考值】 1. Cut-off 值（COV）=阴性对照平均 OD 值×2.1（阴性对照孔 OD 值＜0.10 时，按 0.10 计）。 2. 有效性判定： 阴性对照孔 OD 值≤0.15（若大于 0.15 则实验无效）； 阳性对照孔 OD 值≥0.50（若小于 0.50 则实验无效）。
【检验结果的解释】 样品 OD 值≥COV，判为华支睾吸虫抗体阳性； 样品 OD 值＜COV，判为华支睾吸虫抗体阴性。
【检验方法的局限性】 本试剂盒仅供研究用、不用于临床诊断；
【注意事项】 1. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后，方可开封启用。未使用 完的板条应即时放回有干燥剂的自封袋中，2~8℃密封保存。 2. 滴加试剂前应将滴瓶轻摇、混匀，首滴弃去；滴加试剂时瓶身应保持竖直。 3. 瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。 4. 孵育时，推荐使用水浴箱。如无水浴箱，可取密封湿盒放入 37℃温箱内使用。 5. 用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。