袜子消臭性能测试 袜子抗菌测试评价
针对足癣的抗菌袜是在一定时间内抑制足部细菌生长、繁殖或杀灭细菌的一类功能袜。通过面料的抗菌整理、加工技术将抗菌材料与袜子面料的制造工艺相结合,使袜子具备抗菌性能。目前采用的抗菌技术主要是抗菌剂整理、银离子抗菌以及抗菌纤维抗菌等。
抗菌袜抗菌测试准备1、试验菌
致病真菌:白色念珠菌、红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌,于4 ℃改良 PDA 斜面上保藏。
2、培养基与试剂
改良PDA培养基和20mmol/L的pH值为7.2的磷酸盐缓冲溶液(PBS)。试验所用试剂均为分析纯或适用于微生物试验用的试剂,试验用水为纯水。
3、主要仪器
SYO-DXS-280A型手提式高压灭菌器,BSA2202S型高精度电子天平,HYG-A型全温摇瓶柜,HJ-1型磁力搅拌器,PHS-3E型酸度显示计,SW-CJ-1BU型超净工作台,GNP-9080型隔水式恒温培养箱,冰箱,刻度吸管、试管、烧瓶等微生物试验常用器具。
本研究所用抗菌测试方法为AATCC 100-2004,经改良后使用。
1、样品处理
测试的6种抗菌袜经中性洗涤剂洗涤,常温晾干。分别将其剪成2cmx2cm的正方形,装人250mL锥形瓶中,121℃蒸汽灭菌30min,烘干备用。
2、菌悬液制备
在无菌操作状态下,将白色念珠菌、红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌从保藏斜面分别接入新鲜的改良 PDA 斜面上,置于适宜的温度(白色念珠菌37℃,红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌28℃)下培养一定时间(白色念珠菌2d,红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌5d),对菌种进行活化处理。再往斜面中加人一定量的PBS将孢子或菌体洗脱下来,利用梯度稀释法,使得液体中活菌数达到1x10^8~5x10^8cfu/mL,制得菌悬液。
3、“0h”接触时间取样
1)在无菌环境中,用刻度吸管取1m菌悬液分别滴入已灭菌的样品上,让菌悬液浸润样品。
2)再加入99mL已灭菌的PBS,封口后置于摇床300/min振荡20min。然后分别取稀释度为100、101、102三个梯度的PBS菌液0.1m涂布改良PDA平板。并置于适宜的温度(白色念珠菌37℃红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌28℃)下培养一定时间(白色念珠菌2d,红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌5d),计算活菌数。
4、“18 h”取样
在2.5.3节1)完成后,封口置于适宜的温度(白色念珠菌37 ℃,红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌28℃)下培养18h。再加人99mL已灭菌的PBS,封口后置于摇床,300/min振荡20 min。然后分别取稀释度为100、101、102三个梯度的PBS菌液0.1m涂布改良PDA平板。并置于适宜的温度(白色念珠菌37 ℃,红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌28℃)下培养一定时间(白色念珠菌2d,红色毛癣菌、须癣毛癣菌和絮状表皮癣菌5 d),计算活菌数。
5、抑菌率计算方法
菌落计数直接用肉眼观察即可(必要时采用放大镜),活菌数计数的报告方法可按下述原则进行:
(1)首先从100、101、102的三个稀释度中,选择菌落数 20~200的平板作为菌落总数测定标准。统计公式:菌落总数=平板菌落数x其稀释倍数。
(2)若两个稀释度,其生长的菌落数均在20~200,则按两者菌落总数之比值来决定。若比值小于2,应报告两者的平均数;若比值大于2,则报告其中较小的菌落总数。
(3)若所有稀释度的平均菌落数均大于200则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(4)若所有稀释度的平均菌落数均小于20,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(5)若所有稀释度的平均菌落数均不在20~200,则以最接近20或200的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。