1主题内容 与适用范围
1.1 主题内容
本标准规定了测定水环境急性毒性的发光细菌法。
1.2 适用范围
本标准适用于工业废水、纳污水体及实验室条件下可溶性化学物质的水质急性毒性监测。
2方法提要
基于发光细菌相对发光度与水样毒性组分总浓度呈显著负相关(P≤0.05),因而可通过生物发光
光度计测定水样的相对发光度,以此表示其急性毒性水平。
水质急性毒性水平按8所述条件选用相当的参比毒物氯化汞浓度(以mg/L为单位)来表征,或选
用ECso值(半数有效浓度一以 样品液百分浓度为单位)来表征。
3试剂和材料
本标准所用试剂除另有说明外,均应为符合国家标准的分析纯试剂、蒸馏水或同等纯度的水。
3.1氯化汞 HgCl2。
3.2氯 化钠NaCl,化学纯。
3.3明亮发光杆菌 Ts小种(Photobacterium phosphoreum T, spp. )冻干粉,安瓿瓶包装,每瓶0. 5 g,在
2~5C冰箱内有效保存期为6个月。新制备的发光细菌休眠细胞(冻干粉)密度不低于每克800万个细
胞:当按6.2.4步骤将冻干粉复苏2min后即发光(可在暗室内检验.肉眼应见微光).稀释成工作液后
每毫升菌液不低于1. 6万个细胞(5 ml测试管)或2万个细胞(2 ml测试管)(均为稀释平板法测定)。在
毒性测试仪上测出的初始发光量应在600~1900mV之间,低于600mV允许将倍率调至“X2”档,高
于1900 mV允许将倍率调至“X0.5”档。仍达不到标准者,更换冻干粉。
3.4氯化钠溶液,3 g/100 ml。.
氯化钠3g于玻璃容器内,用量筒加蒸馏水100ml。
3.5氯化钠溶液,2 g/100 ml。
氯化钠2 g,加蒸馏水100 ml,于试剂瓶内,2~5C保存。
3.6参比毒物氯化汞标准溶液。
0. 02,0. 04,0. 06,0. 08,0.10,0. 12,0. 14,0. 16,0.18,0. 20,0. 22,0.24 mg/L.
3.7氣 化汞母液,p= 2000 mg/L.
万分之-分析天平精 称密封保存良好的无结晶水氯化汞0. 100 Og入50 ml容量瓶,用3g/100 ml
氯化钠溶液稀释至刻度,置2~5C冰箱备用,保存期6个月。