由于crispr/cas9系统简单易用,可以对几乎任意基因进行基因编辑,所以收到广泛欢迎,成为科学研究一种极其重要的工具。它已被迅速而广泛地采用,包括用于人类细胞研究。从根本上说,crispr/cas9系统可以靶定活细胞中的任何基因组区域,并改变遗传信息,这在过去几十年里一直是研究中的圣杯。从根本上说,能够靶定和改变活细胞中的遗传信息,是一个梦想。
但是 crispr/cas9基因编辑系统有潜在的脱靶作用。对指定基因位点进行编辑的同时,可能导致基因组上数个相似位点的突变。为了解决这一问题,church实验室研究了d10a突变的cas9蛋白(cas9nickase)。cas9 nick蛋白与野生型cas9蛋白不同,cas9nickase蛋白结合grna后对dna进行单链切割,产生一个dna缺口。单独cas9nickase产生的缺口产生的缺口一般会被修复,不会产生dna突变。使用一对grna同时对dna进行切割,可使dna断裂,从而通过同源重组或者邻端接合产生实现基因敲除。
我公司现提供cas9野生蛋白表达质粒和cas9突变蛋白表达质粒及相应配套载体。
详情请见http://www.inovogen.com/geneknockout/crispr-cas9/cas9_grnakit/