各种培养基配方

1.营养肉汤 成分:蛋白胨 10g,牛肉膏 3g,氯化钠 5g,蒸馏水 1000ml,ph7.4. 制法:按上述成分混合,溶解后校正 ph,121℃高压灭菌 15min. 2.营养琼脂培养基 成分:蛋白胨 10g,牛肉膏 3g,氯化钠 5g,琼脂 17g,蒸馏水 1000ml,ph7.2. 制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正 ph,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min 高压灭 菌备用. 3.mrs 培养基 成分:蛋白胨 10g,牛肉膏 10g,酵母粉 5g,k2hpo4 2g,柠檬酸二铵 2g,乙酸钠 5g,葡萄糖 20g,吐温 80 1ml,mgso4 .7h2o 0.58g,mnso4 4h2o 0.25g, (琼脂 15~20g) ,蒸馏水 1000ml. 制法: 将以上成分加入到蒸馏水中, 加热使完全溶解, ph 至 6.2~6.4, 调 分装于三角瓶中, 121℃,灭菌 15min. 4.脱脂乳培养基 成分:牛奶,蒸馏水. 制法:将适量的牛奶加热煮沸 20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮.除去上层乳脂即得脱脂乳.将脱脂乳 盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在 108℃条件下蒸汽灭菌 10~15min,即得脱脂乳培养基. 5.培养基 a 成分:蛋白胨 10.0g,酵母提取物 1.0g,葡萄糖 10.0g,nacl5.0g,琼脂 15.0g,水 1000ml.制法:将以上 成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调 ph 至 7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌 15min. 6.ptyg 培养基 成分:胰胨 tryptone(oxoid)5g,大豆蛋白胨 5g,酵母粉(oxoid)10g,葡萄糖 10g,吐温 80 0 1ml, 琼脂 15~20g,l-半胱氨酸盐酸盐 0.05g,盐溶液 4ml. 制法: 将以上成分加入到蒸馏水中, 加热使完全溶解, ph 至 6.8~7.0, 调 分装于三角瓶中, 115℃灭菌 30min. 盐溶液制备:无水氯化钙 0.2g,k2hpo4 1.0g,kh2po4 1.0g,mgso4 .7h2o 0.48g,naco3 10g,nacl 2g,蒸馏水 1000ml,溶解后备用. 7.豆芽汁液体培养基 成分:豆芽汁 10ml,磷酸氢二铵 1g,kcl 0.2g,mgso4.7h2o 0.2g,琼脂 20g. 制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调 ph 至 6.2~6.4,分装于三角瓶中,0.04%的溴甲 酚紫酒精溶液(黄色 5.2~6.8 紫色)作为指示剂,115℃灭菌 20min. 豆芽汁制备:将黄豆芽或绿豆芽 200g 洗净,在 1000ml 中煮沸 30 min,纱布过滤得豆芽汁,补足水分至 1000ml. 8.麦芽汁琼脂培养基 成分:优质大麦或小麦,蒸馏水,碘液. 制法:取优质大麦或小麦若干,浸泡 6~12h,置于深约 2cm 的木盘上摊平,上盖纱布,每日早,中,晚各 淋水一次,麦根伸长至麦粒两倍时,停止发芽晾干或烘干. 称取 300g 麦芽磨碎,加 1000ml 水,38℃保温 2h,再升温至 45℃,30min,再提高到 50℃,30min,再升 至 60℃,糖化 1~1.5h. 取糖化液少许,加碘液 1~2 滴,如不为蓝色,说明糖化完毕,用文火煮半小时,四层纱布过滤.如滤液不 清,可用一个鸡蛋清加水约 20ml 调匀,打至起沫,倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤,即可得澄清麦芽汁. 用波美计检测糖化液浓度,加水稀释至 10 倍,调 ph5~6,用于酵母菌培养;稀释至 5~6 倍,调 ph7.2,可 用于培养细菌,121℃灭菌 20min. 9.查(察)氏培养基 成分: nano3 2g, k2hpo4 1g, mgso4. 7h2o 0.5g, kcl 0.5g, feso4.7h2o 0.01g, 蔗糖 30g, 琼脂 15~20g, 蒸馏水 1000ml,ph 值自然. 制法:加热溶解,分装后 121℃灭菌 20min. 10.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(pda) 成分:马铃薯(去皮)200g,葡萄糖(或蔗糖)20g,琼脂 20g,水 1000ml. 制法:ph 值自然.将马铃薯去皮,洗净,切成小块,称取 200g 加入 1000ml 蒸馏水,煮沸 20min,用纱 布过滤,滤液补足水至 1000ml,再加入糖和琼脂,溶化后分装,121℃灭菌 20min.另外,用少量乙醇溶 解 0.1g 氯霉素,加入 1000ml 培养基中,分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数,分离. 11.py 基础培养基 成分:蛋白胨 0.5g,酵母提取物 1.0g,胰酶解酪胨 (trypticase) 0.5g,盐溶液ⅱ 4.0ml,蒸馏水 1000ml. 盐溶液ⅱ成分: cacl2 0.2g, mgso4.7h2o 0.48g, k2hpo4 1.0g, kh2po4 1.0g, nahco3 10.0g, nacl 2.0g, 蒸馏水 1000ml. 制法:加热溶解,分装后 121℃灭菌 20min. 12.甘露醇琼脂培养基(msa) 成分:牛肉浸膏 1g,月示胨 no.3(difco)10g,d-甘露醇 10g,nacl 75g,琼脂约 13g,酚红 0.025g,水 1000ml,ph7.2~7.6 制法:按量将各成分(酚红除外)混合,加热使完全溶解,调 ph 至 7.4±0.2.加 1%的酚红溶液 2.5ml, 混匀.121℃高压灭菌 15min 13.高氏一号(淀粉琼脂)培养基(主用于放线菌,霉菌培养) 可溶性淀粉 20g, kno3 1g, nacl 0.5g, k2hpo4 0.5g, mgso4.7h2o 0.5g, feso4.7h2o 0.01g, 琼脂 20g, 蒸馏水 1000ml,ph7.2~7.4,121℃灭菌 20min. 14.淀粉铵盐培养基 (主要用于霉菌,放线菌培养) 可溶性淀粉 10g, (nh4)2so4 2g,k2hpo4 lg,mgso4.h2o lg,nacl 1g,caco3 3g,蒸馏水 1000ml, ph7.2~7.4,121℃灭菌 20min.若加入 15~20g 琼脂即成固体培养基. 15.麦氏培养基(醋酸钠琼脂培养基) 葡萄糖 1.0g,kcl 1.8g,酵母汁 2.5g,醋酸钠 8.2g,琼脂 15g,蒸馏水 1000ml,ph 自然,0.7kg/cm2 灭菌 30min. 16.高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数,分离用) 硝酸钠 2g,磷酸二氢钾 1g,硫酸镁(mgso4 7h2o)0.5g,氯化钾 0.5g,硫酸亚铁 0.01g,氯化钠 60g, 蔗糖 30g,琼脂 20g,蒸馏水 1000ml,115℃灭菌 30min. 注:①分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基.②分离粮 食中的霉菌可用高盐察氏培养基. 17.糖,醇类发酵基础培养基 (1)一般细菌常以休和利夫森二氏培养基 蛋白胨 5g,nacl 5g,k2hpo4 0.2g,糖醇(葡萄糖或其它糖,醇)10g,琼脂 5~6g,1%溴甲酚紫(溴百里 香草酚蓝)3ml,蒸馏水 1000ml,ph7.0~7.2,分装试管,培养基高度约 4.5cm,115℃灭菌 20min. (2)芽孢菌培养基 (nh4)2hpo4 1.0g, kcl 0.2g, mgso4.7h2o 0.2g, 酵母膏 0.2g, 琼脂 5~6g, 糖或醇类 10.0g, 蒸馏水 1000ml, 溴甲酚紫(0.04%)15ml,ph7.0~7.2,分装试管,培养基高度约 4~5cm,112℃灭菌 30min. (3)乳酸菌培养基 蛋白胨 5g,牛肉膏 5g,酵母膏 5g,吐温 80(tween 80)0.5ml,糖或醇 10g,琼脂 5~6 g,蒸馏水(自来 水)1000ml,加入 1.6%溴甲酚紫溶液约 1.4ml.以上调 ph6.8~7.0,分装试管,112℃灭菌 30min. 18.硝酸盐培养基(硝酸盐还原试验用) 蛋白胨 5.0g,kno3 0.2g, 蒸馏水 1000 ml,ph7.4,每管分装 4~5ml,121℃灭菌 15~20min. 吲哚实验培养基:1%胰蛋白胨,调 ph7.2～7.6,分装 1/3~1/4 试管,115℃灭菌 30min. 19.硫化氢试验(纸条法)培养基 蛋白胨 10g,nacl 5g,牛肉膏 10g,半胱氨酸 0.5g,蒸馏水 1000ml,ph7.0～7.4,分装试管,每管液层 高度 4~5cm,112℃灭菌 20~30min.另外将普通滤纸剪成 0.5~1cm 宽的纸条,长度根据试管与培养基高度 而定.用 5%~10%的醋酸铅将纸条浸透,然后用烘箱烘干,放于培养皿中灭菌备用. 20.尿素培养基(尿酶试验) 成分: 蛋白胨 1.0g, 葡萄糖 1.0g, nacl 5.0g, kh2po4 2.0 g, 0.4%酚红 3.0ml, 琼脂 20.0g, 20%尿素 100.0ml, ph7.1~7.4. 制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正 ph 值,加入琼脂,加热熔化并分装于三角瓶,121℃灭菌 15min,冷却至 50~55℃,加入过滤除菌的尿素溶液,分装于灭菌试管内,摆成琼脂斜面备用. 21.氮源利用基础培养基 kh2po4 1.36g,nah2po4 2.13g,mgso4 7h2o 0.2g,feso4.7h2o 0.2g,cacl2 0.5g,葡萄糖 10.0g,蒸 馏水 1000ml. 将需要测定的氨基酸,氨态氮(如磷酸氢二氨) ,硝态氮(如硝酸钾)加入到上述基础培养基中,使其终 浓度为 0.05~0.1%,如测定菌不能利用葡萄糖为碳源,可用其它碳源代替(终浓度为 0.2~0.5%) ,另做一 份不加氮源的空白对照,调 ph7.0~7.2,分装于试管,每管 4~5ml,112℃灭菌 20~30min,制备出的培养 基要求无沉淀. 22.甲基红培养基(m.r 及 v-p 试验用) 蛋白胨 7.0g,葡萄糖 5.0g,k2hpo4(或 nacl)5g,水 1000ml,ph7.0~7.2,每管分装 4~5ml,115℃灭 菌 30min. 23.动力,靛基质,尿素(miu)综合培养基 (用于检验细菌运动性,吲哚,尿素酶用) 蛋白胨(含色氨酸)30 g,kh2po4 2g,nacl 5g,琼脂 3 g,0.2%酚红酒精溶液 2ml,尿素 20g,蒸馏水 1000ml.分装于小试管,112℃灭菌 15min,灭菌后液体应呈淡黄色. 24.半固体培养基(用于细菌的动力试验) 牛肉膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,琼脂 3~5g,蒸馏水 1000ml,ph7.2~7.4,熔化后分装试管(8ml)121℃灭菌 15min,取出直立试管待凝固. 25.m17 琼脂培养基(分离,培养乳球菌等的选择培养基) 植物蛋白胨 5g,酵母粉 5g,聚蛋白胨 5g,抗坏血酸 0.5g,牛肉膏 2.5g,mgso4 7h2o 0.01g,ß-甘 油磷酸二钠 19g,蒸馏水 1000ml,121℃灭菌 15min. 26.蛋白胨水溶液(靛基质试验用) 蛋白胨 20.0g,nacl 5.0g,蒸馏水 1000ml,ph7.4,121℃灭菌 15min. 27.精氨酸双水解酶实验培养基 成分:蛋白胨 1g,氯化钠 5g,k2hpo4 0.3g,l-精氨酸 10g,琼脂 10g,酚红 0.01g,蒸馏水 1000ml. 制法:除酚红外,将以上各成分溶解,调节 ph7.0~7.2,加入指示剂,分装试管,培养基高约 4~5cm,121℃ 灭菌 20min 备用. 28.葡萄糖氧化发酵培养基 成分:蛋白胨 2g,氯化钠 5g,1%溴百里酚蓝水溶液 3ml,琼脂 5~6g,k2hpo4 0.2g,葡萄糖 1%,蒸馏 水 1000ml. 制法:除溴百里酚蓝外,溶解以上各成分,调节 ph 值为 6.8~7.0,分装试管,用 115℃灭菌 20min 备用. 29.假单胞菌选择培养基(psa) 基础成分: 多价胨 16g, 水解酪蛋白 10g, 硫酸钾 10g, 氯化镁 1.4g, 琼脂 11g, 甘油 10ml, 蒸馏水 1000ml, ph7.1±0.2. cfc 选择添加物:溴化十六烷基三甲胺 10mg/l,梭链孢酸钠 10mg/l,头孢菌素 50mg/l. 制法:先将基础成分加热煮沸使之完全溶解,121℃,15min 条件下灭菌.冷却到 50℃备用.当基础培养 基冷却到 50℃后加入溶解后过滤除菌的 cfc 补充物,完全混合后倒平板备用. 30.乳糖胆盐发酵培养基 成分:蛋白胨 20g,猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g,乳糖 10g,0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml,蒸馏水 1000ml, ph7.4. 制法: 将蛋白胨, 胆盐及乳糖溶于水中, 校正 ph, 加入指示剂, 分装每管 10ml, 并放入一个小倒管, 115℃, 15min 高压灭菌. 注:双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外,其他成分加倍. 31.伊红美兰琼脂培养基 成分:蛋白胨 20g,乳糖 10g,磷酸氢二钾 2g,琼脂 17g,2%伊红 y 溶液 20ml,0.65%美兰溶液 10ml, 蒸馏水 1000ml,ph7.1. 制法:将蛋白胨,磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中,校正 ph,分装于烧瓶内,高压灭菌 121℃,15min 备用. 临用时,加入乳糖,并加热溶化琼脂,冷至 50～55℃,加入伊红和美兰溶液,摇匀,倾注平板. 32.乳糖发酵培养基 成分:蛋白胨 20g,乳糖 10g,0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml,蒸馏水 1000ml,ph7.4. 制法:将蛋白胨,乳糖溶于水中,校正 ph,加入指示剂,按检验要求分装 30ml,10ml 或 3ml,并放入 一个小倒管,115℃,15min 高压灭菌. 33.胰酪胨大豆肉汤 成分:胰酪胨(或胰蛋白胨)17g,植物蛋白胨(或大豆蛋白胨)3g,氯化钠 100g,磷酸氢二钾 2.5g,葡 萄糖 2.5g,蒸馏水 1000ml. 制法:将上述成分混合,加热并轻轻搅拌溶液,分装后 121℃15min 高压灭菌.最终 ph7.3±0.2. 34.7.5%氯化钠肉汤 成分:蛋白胨 10g,牛肉膏 3g,氯化钠 75g,蒸馏水 1000ml,ph7.4. 制法:将上述成分加热溶解,校正 ph,分装试管,121℃15min 高压灭菌. 35.豆粉琼脂 成分:牛心消化汤 1000ml,琼脂 20g,黄豆粉浸液 50ml,ph 7.4~7.6. 制法:将琼脂加在牛心消化汤中,加热溶解,过滤.加入黄豆粉浸液,分装每瓶 100ml,121℃15min 高 压灭菌. 36.血琼脂平板 成分:豆粉琼脂 100ml,脱纤维羊血(或兔血)5~10ml. 制法:加热融化琼脂,冷至 50℃,以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血,摇匀,倾注平板.或分装灭菌试管, 摆成斜面. 37.aird-parker 氏琼脂平板 成分:胰蛋白胨 10g,牛肉膏 5g,酵母膏 1g,丙酮酸钠 10g,甘氨酸 12g,氯化锂(licl6h2o)5g,琼 脂 20g,蒸馏水 950ml,ph7.5. 增菌剂的配法:30~50%卵黄盐水 50ml 与除菌过滤的 1%亚碲酸钾溶液 10ml 混合,保存在冰箱内. 制法:将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解.冷至 25℃,矫正 ph.分装每瓶 95ml,121℃高压 灭菌 15min.临用时,加热融化琼脂,冷至 50℃,每 95ml 加入预热至 50℃的卵黄-亚碲酸钾增菌剂 5ml, 摇匀后倾注平板.培养基应是致密不透明的.使用前在冰箱储存不得超过 48h. 38.肉浸液 成分:绞碎牛肉 500g,氯化钠 5g,蛋白胨 10g,磷酸氢二钾 2g,蒸馏水 1000ml,ph 7.4～7.6. 制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉 500g,混合后放冰箱 24h,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣 完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解 后矫正 ph7.4～7.6 煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃,30min 高压灭菌. 39.兔血浆 成分:柠檬酸钠 0.106 mol/l(31.3g na3c6h5o72h2o 溶于 1l 蒸馏水中) 制法:一份加兔血 9 份混合后离心 2000rpm,10min 吸取上清液即为兔血浆. 40.肠毒素产毒培养基 成分:蛋白胨 20g,胰消化酪蛋白 200mg,氯化钠 5g,磷酸二氢钾 1g,氯化钙 0.1g,硫酸镁 0.2g,菸酸 0.01g,蒸馏水 1000ml,琼脂 10~12g(固体透析培养用) ,ph7.2~7.4. 41.葡萄糖肉浸液肉汤 成分:绞碎牛肉 500g,氯化钠 5g,蛋白胨 10g,磷酸氢二钾 2g,葡萄糖 10g,蒸馏水 1000ml,ph7.4～7.6. 制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉 500g,混合后放冰箱 24h,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣 完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,葡萄,氯化钠和磷酸盐, 溶解后校正 ph,煮沸并过滤,分装,121℃30min 高压灭菌. 42.牛心浸液 成分:绞碎牛心 500g,氯化钠 5g,蛋白胨 10g,磷酸氢二钾 2g,蒸馏水 1000ml,ph7.4～7.6. 制法:将绞碎牛心 500g,混合后放冰箱 24h,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块, 用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正 ph,煮 沸并过滤,分装,121℃,30min 高压灭菌. 43.匹克氏肉汤 成分:含 1%胰蛋白胨的牛心浸液 200ml,1:25000 结晶紫盐水溶液 10ml,1:800 三氮化钠溶液 10ml, 脱纤维兔血(羊血)10ml. 制法:将上述已灭菌的各种成分,无菌依次混合,分装于无菌试管内,每管 2ml,保存冰箱内备用. 44.胰蛋白胨大豆胨琼脂(tsa) 成分:胰蛋白胨 15g,大豆胨 5g,氯化钠 5g,琼脂约 13g,蒸馏水 1000ml,ph7.1～7.5. 制法:按量将各成分溶解,加热使完全溶解,调 ph 值,121℃,15min 灭菌. 45.缓冲蛋白胨水(bp)培养基 成分:蛋白胨 l0g,nacl5g,na2hpo4.12h20 9g,h2po4 1.5g,蒸馏水 1000ml,ph7.2. 制法:121℃灭菌 15min,沙门氏菌前增菌使用. 46.氯化镁孔雀绿(mm)增菌液 成分: 甲液:胰蛋白胨 5g,nacl 8g,kh2p04 1.6g,蒸馏水 1000m1 乙液:mgcl2 40g,蒸馏水 100ml 丙液:0.4%孔雀绿水溶液 制法:分别按上述成分配好后,121℃灭菌 15min 备用.临用时取甲液 90ml,乙液 9ml,丙液 0.9ml 以 无菌操作混合即成. 47.四硫磺酸钠煌绿(ttb)增菌液 成分:多胨或胨 1g,caco3 10g,na2s203 30g,蒸馏水 1000m1. 制法:将各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶 100m1.分装时应随时振荡,使其中的 caco3 混匀. 121℃灭菌 15min 备用.临用时每 100m1 培养基中加入碘溶液 2m1,0.1%煌绿 1m1. 48.亚硒酸盐胱氨酸(sc)增菌液 成分: 蛋白胨 5g, 乳糖 4g, 亚硒酸氢钠 4g, na2hpo4 5.5g, kh2po4 4.5g, l—胱氨酸 0.01g, 蒸馏水 1000m1, ph7.0. 制法:将除亚硒酸氢钠和胱氨酸以外的各种成分溶解于 900ml 蒸馏水中,加热煮沸,冷却备用.另将亚硒 酸氢钠溶解于 100ml 蒸馏水中,加热煮沸,冷却,以无菌操作与上液混合.再加入 1%l-胱氨酸—氢氧化 钠溶液 1m1.分装于灭菌瓶中,每瓶 l00ml. 49.亚硫酸铋琼脂(bs)培养基 成分: 蛋白胨 10g, 牛肉膏 5g, 葡萄糖 5g, feso4 0.3g, na2hpo4 4g, 煌绿 0.025g, 柠檬酸铋铵 2g, na2so4 6g, 琼脂 20g, 蒸馏水 1000ml,ph7.5. 制法:将前 5 种成分溶解于 300ml 蒸馏水中,再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用 50m1 蒸馏水溶解.将琼脂 于 600ml 蒸馏水中煮沸溶解, 冷至 80℃左右. 将以上三液合并, 补充蒸馏水至 1000m1, 校正 ph, 0.5% 加 煌绿水溶液 5ml ;摇匀.冷却至 50~55℃,倾注平板. 注:此培养基不需高压灭菌.制备过程中不宜过分加热,以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存 于室温暗处.超过 48h 不宜使用. 50.dhl 琼脂培养基 成份:蛋白胨 20g,牛肉膏 3g,乳糖 10g,蔗糖 10g,去氧胆酸钠 1g,na2s203 2.3g,柠檬酸钠 1g,柠檬 酸铁铵 1g,中性红 0.03g,琼脂 20g,蒸馏水 1000ml,ph7.3. 制法:除中性红和琼脂外,将其他成分溶解于 400m1 蒸馏水中,校正 ph 值.再将琼脂溶于 600ml 蒸馏水 中,两液合并,加 0.5%中性红水溶液 6ml,待冷至 50~55℃,倾注平板. 51.he 琼脂培养基 成份:月示 胨 12g,牛肉膏 3g,乳糖 12g,蔗糖2g,水杨素 2g,胆盐 20g,nacl 5g,琼脂 20g,蒸馏水 1000m1,0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16ml,andrade 指示剂 20ml,甲液 20ml,乙液 20m1. 制法:将前七种成分溶解于 400ml 蒸馏水中.作为基础液,加入甲液和乙液,校正 ph 值为 7.5,再加入 指示剂;将琼脂溶于 600m1 蒸馏水中.二者合并,待冷至 50~55℃,倾注平板. 注:①此培养基不可高压灭菌;②andrade 指示剂:酸性复红 0.5g,1m naoh 溶液 16m1,蒸馏水 100ml. 制法为:将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如果复红退色不全,再加氢氧化钠溶液 1~2ml.③甲液:na2s203 34g,柠檬酸铁铵 4g,蒸馏水 100m1.④乙液:去氧胆酸钠 10g,蒸馏水 100ml. 52.s.s.琼脂 (1)基础培养基 成分:牛肉膏 5g,月示 胨 5g,三号胆盐 3.5g,琼脂 17g,蒸馏水 1000ml. 制法:将牛肉膏,月示 胨和胆盐溶解于 400ml 蒸馏水中,将琼脂溶于 500m1 蒸馏水中,二液混合,121℃ 灭菌 15min 备用. (2)完全培养 成分:基础培养基 1000ml,乳糖 10g,柠檬酸钠 8.5g,na2s203 8.5g,10%柠檬酸铁溶液 10m1,1%中性 红溶液 2.5m1,0.1%煌绿溶液 0.33m1. 制法:加热熔化基础培养基,按比例加入上述染料以外的各成分,充分混合均匀,校正 ph 值为 7.0,加入 中性红和煌绿溶液,倾注平板. 注:制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于 48h 内使用;煌绿溶液配好后应在 10d 以内使用. 53.靛基质试验培养基 成分:蛋白胨 10g,氯化钠 5g,水 1000ml,ph7.3~7.5. 制法: 称取各成分, 加入水中加热溶化. 1mol/l naoh 调至 ph 7.4~7.5. 用 分装小试管, 每管约 3ml, 116℃, 15min 高压灭菌后 4~10℃保存备用. 54.三糖铁琼脂(tsi) 成分: 蛋白胨 20g, 硫代硫酸钠 0.2g, 乳糖 10g, 蒸馏水 1000ml, 硫酸亚铁铵 0.2g, 蔗糖 10g, 酚红 0.025g, 氯化钠 5g,牛肉膏 5g,琼脂 12g,葡萄糖 1g,ph7.4. 制法:将除琼脂和酚红以外的各种成分溶解于蒸馏水中,校正 ph.加入琼脂,加热煮沸以溶化琼脂.加 入 0.2%酚红水溶液 12.5ml,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌 15min 后放置高层斜面备用. 55.尿素琼脂 成分:蛋白胨 1g,葡萄糖 1g,0.4%酚红溶液 3ml,蒸馏水 1000ml,氯化钠 5g,磷酸氢二钾 2g,琼脂 20g, 20%尿素溶液