牛肉膏蛋白胨培养基配方：

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和nacl。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而nacl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。   由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其ph调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。   牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：   牛肉膏 3g   蛋白胨 10g   nacl 5g   琼脂 15—20g   水 1000ml   ph 7．4—7．6   三、器材   牛肉膏，蛋白胨， nacl，琼脂；   1mol/l naoh， 1mol/l hcl；   试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，ph试纸（ ph 5．5—9．0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。   四、操作步骤   1．称量   按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、nacl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。   2．溶化   在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。   3．调ph   在未调ph前，先用精密ph试纸测量培养基的原始ph值，如果ph偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/l naoh，边加边搅拌，并随时用ph试纸测其ph值，直至ph达7．6。反之，则用1mol/l hcl进行调节。注意ph值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。   对于有些要求ph值较精确的微生物，其ph的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有关说明书）。   4．过滤   趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去（本实验无需过滤）。   5．分装   按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图ⅴ-1。   分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。   (1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。   (2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面，如图ⅴ-2。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。   (3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。   6．加塞   培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能（棉塞制作方法附本实验后面）。   7．包扎   加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。   8．灭菌   将上述培养基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃， 20分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。   9．搁置斜面   将灭菌的试管培养基冷至50℃左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。   10．无菌检查

  将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底